上海豐翔生物科技有限公司是國內免疫學產品主要供應商之一，提供各種原裝、分裝檢測ELISA試劑盒,質優價廉.我們均有具有豐富服務經驗和深厚專業背景的人員團隊為您提供技術服務和支持,有任何試劑盒方面的問題都能幫您解決,免除您的后顧之憂。并可以免費代檢測，讓您的實驗省時省力，更好的為您服務。如有其他問題請及時。                                                                                                        
產品名稱：

大鼠 S-100 B蛋白酶聯免疫分析（ELISA）試劑盒使用說明書

規格：原裝/96T 分裝 48T/96T

本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關液體樣本中 S-100 B蛋白含量。

標本處理及要求 

1．血清、血漿標本可直接測定；

2．尿液、腦脊液、腹腔液：2000-3000轉/分離心10分鐘后，取上清液待測。

3．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

4．采集后盡早進行實驗，若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

試劑盒組成

自備物品

1 、 37 ℃ 恒溫箱

2 、 標準規格酶標儀

3 、 精密移液器及一次性吸頭

4 、 蒸餾水

5 、 一次性試管

6 、 吸水紙

操作步驟

1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔 10 孔，在*、第二孔中分別加標

準品 100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二

孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，

混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔

中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各

取 50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl，混

勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準

品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，

濃度分別為120ng/L，80ng/L ，40ng/L，20ng/L，10ng/L）。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣

品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣

品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混

勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。     

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此

重復 5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同 3。

8. 洗滌：操作同 5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止

液后 15分鐘以內進行。

計算

    以標準物的濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的

OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標

準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，

即為樣品的實際濃度。

注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔OD值的），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 嚴格按說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

6．本試劑不同批號組分不得混用。

7．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．底物請避光保存。

檢測范圍：

8ng/L -150ng/L   

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月